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外泌体RNA测序

发布时间 2017-09-14

  外泌体作为活细胞分泌的含有RNA和蛋白质的微囊,广泛分布于外周血、尿液、唾液、腹水、羊水等多种体液中。最新研究表明,体液中外泌体RNA(特别是miRNA等非编码RNA)在不同的疾病模型中存在明显的表达差异。同时,这些分子被外泌体的脂膜所包裹和保护,能保持其原有稳定性和生物学功能,有望成为液体活检的重要分子标志物。通过高通量技术对外泌体RNA进行测序,可快速高效获得外泌体RNA的全面信息,是疾病诊断和随访的理想手段。

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样本要求

测序策略

交付周期

样品类型: Total RNA、细胞上清、血液、尿液等

样品浓度: ≥500pg/μl,细胞上清≥30ml,血液≥3ml

样品总量: ≥3ng

测序模式Hiseq3000/4000(PE150)

测序深度10-16G clean data

60

   注:分离外泌体前的样品不能加入任何RNA保护剂(如TRIzol,RNAlater);血清,血浆,外泌体等样品属于特殊样品,提取风险较大,博越致和不承诺提取的成功率。其他特殊样品请与销售或技术支持联系。

  提取优势:领先的外泌体提取技术,全面提升外泌体的产量和纯度;

  样品兼容性强:广泛样品兼容性,适用于血清,血浆,尿液,细胞培养上清等。

 

  健康及癌症病人血浆中胞外囊泡的RNA表达谱研究

  研究背景:

  胞外囊泡会选择性包装RNA,可以作为潜在疾病生物标志物。研究通过对血浆胞外囊泡中的RNA进行测序分析,来挖掘具有生物标识物潜力的RNA。

  研究内容:

  为了系统地描述循环系统RNA(exRNA)表达情况。我们对来源于50名健康个体和142名癌症患者血浆的胞外囊泡进行了RNA测序分析,每个样本测序深度约1260万原始测序读长。

  研究结果:

  Mapping处理发现约540万个 RNA,包括微RNA(约40.4%),piRNAs(约40.0%),lncRNAs(约2.4%),tRNA(约2.1%)和mRNA(约2.1%);

  通过表达稳定性分析,研究发现了一组miRNA在不同的样本中有相对一致的表达丰度;

  通过协方差多因素分析,研究发现exRNAs与年龄,性别和不同类型的癌症显著的相关。下调的miR-125a-5p和miR-1343-3p显示出与所有测试的癌症类型的关联(FDR<0.05);

  研究为exRNA提供了一些基准参考信息,同时也发现了具有成为生物标识物潜力的RNA。

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图1. 转录组分析外泌体中RNA的种类

  1. Yuan T, Huang X, Woodcock M, et al. Plasma extracellular RNA profiles in healthy and cancer patients[J]. Scientific Reports, 2016, 6:19413.

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