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单细胞测序

发布时间 2017-09-20

  单细胞测序(Single-cell sequencing)是在单细胞水平对基因进行扩增与测序,并对获得的数据进行生物信息学分析的一项新技术。单细胞测序可针对性揭示单个细胞基因结构信息,成功解决了用组织样本测序难以解决的细胞异质性(heterogeneity)难题,可用于揭示细胞群体差异和细胞进化关系。

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样本要求

测序策略

交付周期

样品类型活体新鲜分离细胞;

样本体积单细胞样本体积不高于0.5μl为宜;

样品总量重复单细胞样本数不少于5

测序模式Hiseq3000/4000 (PE150)

测序深度:肿瘤单细胞30-50X

    其他单细胞30X

50

  技术成熟:成熟的单细胞扩增技术,可对分离的单细胞中微量全基因组DNA进行高效扩增,基因组覆盖度达80%以上;

  个性化解决方案:提供标准分析+高级分析+个性化定制方案,提供全面的解决方案。

  单细胞转录组测序揭示人CD127+先天淋巴细胞的异质性


  研究背景:


  先天淋巴细胞(ILCs)是一种免疫细胞,它通过释放可溶性的因素调节对病毒、细菌和寄生虫的早期免疫反应。这些细胞可以根据细胞表面的转录因子及细胞因子被分为三个亚型,每种亚型都有不同的功能。


  研究内容:


  用流式细胞仪分选患有阻塞性睡眠呼吸暂停综合症患者的扁桃体组织中的ILCs (Lin?CD127+)和NK cells(CD45+Lin?CD127? NKG2A+CD56+CD16?),进行单细胞测序,通过序列比对,基因差异表达分析以及细胞分型,来挖掘新的免疫细胞。


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图1. ILC1、ILC2、ILC3差异基因表达分析


  研究结论:


  本研究通过对648个单细胞进行单细胞转录组的分析,应用t-SNE细胞分型、SCDE基因差异表达分析,在ILC3中发现新的免疫细胞CD62L+ ILC3。

  1. Asa K Bj?rklund, Forkel M, Picelli S, et al. The heterogeneity of human CD127+ innate lymphoid cells revealed by single-cell RNA sequencing [J]. Nature Immunology, 2016, 17(4):451-460.